液相色谱串联质谱法检测肝癌细胞N6- 甲基腺嘌呤核苷甲基化水平

目的 建立同时测定N⁶-甲基腺嘌呤核苷(m⁶A)和腺嘌呤核苷(A)的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。方法 HepG₂和L₀₂细胞mRNA经分离、消化为核苷,再经含对乙酰氨基酚为内标的甲醇沉淀处理。色谱柱为Agilent Proshell 120 EC-C₁₈柱,流动相为0.1 g/dl甲酸水-甲醇(82:18),流速0.4 ml/min,柱温为30 ℃。质谱检测模式为多反应监测(DMRM)模式,测定m⁶A和A的浓度,计算细胞m⁶A甲基化水平。 结果 建立的LC-MS/MS法检测m⁶A和A的浓度分别在0.15～50.00 ng/ml和1.50～500.00 ng/ml浓度范围内线性关系良好(r > 0.999),日内、日间精密度均小于15.00 %,准确度为93.67 %～101.10 %,回收率为91.46 %～97.60 %,基质效应为90.26 %～99.27 %,样品稳定性良好。HepG₂和L₀₂细胞m⁶A甲基化水平分别为(0.73 ± 0.11)%和(1.26 ± 0.22)%。结论 该方法准确、快速、稳定和灵敏,可用于检测肝癌细胞m⁶A甲基化水平。     

流式细胞术在侵袭性NK细胞白血病诊断中的价值:1例报道并文献复习

本研究笔者于侵袭性NK细胞白血病诊断中引入流式细胞术,特诊断其开展有效机制进行分析。     

来曲唑对多囊卵巢综合征患者性激素结合球蛋白水平及糖脂代谢指标的影响

目的探究来曲唑(LE)对多囊卵巢综合征(PCOS)患者性激素结合球蛋白(SHBG)水平及糖脂代谢指标的影响。方法选取2016年6月至2019年6月本院诊治的80例PCOS患者为研究对象。根据非随机临床同期对照研究及患者自愿原则分为观察组、对照组,每组40例,对照组患者口服枸橼酸氯米芬片(初始剂量50 mg/d,无排卵反应后增至100mg/d)治疗,观察组给予LE(月经第5天口服LE,5 mg/d)治疗,两组均持续给药5 d,比较治疗前、疗程结束后两组糖脂代谢指标[总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDLC)、三酰甘油(TG)及空腹胰岛素(INS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]、SHBG水平、性激素[卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)]水平、排卵、妊娠情况及药物安全性。结果与同组治疗前比较,疗程结束后两组TC、LDLC、TG、INS、HOMA-IR明显降低(P<0.05),且观察组INS、HOMA-IR明显低于对照组(P<0.05),与同组治疗前比较,疗程结束后两组SHBG、FSH明显升高、LH、E2、T明显降低,且观察组SHBG、FSH相较于对照组显著升高、LH、E2、T显著降低(P<0.05),观察组周期排卵率、临床妊娠率明显高于对照组(χ^2=4.228、4.073,P<0.05),观察组不良反应总发生率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论LE治疗PCOS患者的促排卵效果显著,可明显降低SHBG水平、调节性激素水平并提高临床妊娠率,而促排卵治疗前需指导应用抗雄激素药物、胰岛素增敏剂以有效调节患者的糖脂代谢指标。     

肾康注射液通过TGF β1/Smad3信号通路抑制失血性休克大鼠肾损伤

目的探讨肾康注射液对失血性休克大鼠肾功能保护作用,初步探讨其作用机制。方法 SD大鼠45只,随机分为假手术组(Sham组)、失血性休克模型组(HS组)及肾康注射液治疗组(SK组),采用股动脉放血法建立失血性休克大鼠模型,HS组自体血液回输复苏,SK组予以腹腔注射肾康注射液,各组于HS发生后4h处死大鼠,观察各组大鼠血清中肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)浓度变化,HE、Masson染色观察肾脏组织病理学变化,Western blot检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β1、smad3、p-smad3蛋白表达。结果 HS组大鼠肾功能损伤严重,血清中SCr、BUN浓度明显升高,病理学可见肾小球上皮细胞空泡变性,结构破坏严重,界线不清,大量炎性细胞浸润及胶原蛋白沉积,肾脏纤维化程度较高。经肾康注射液干预后,SK组肾功能明显减轻,血清中SCr、BUN浓度明显降低,病理学观察到肾小球上皮细胞结构完整,界线清楚,细胞排列基本有序,仅可见少量胶原蛋白沉积,纤维化程度较轻,同时,肾脏组织中TGF-β1、smad3、p-smad3蛋白表达明显受到抑制。结论肾康注射液改善失血性休克大鼠肾功能损伤,抑制肾脏纤维化,与其下调TGF-β1、smad3、p-smad3蛋白表达,调控TGFβ1/Smad3信号通路相关。     

全自动血细胞分析仪、血液涂片细胞形态学联合应用在血常规检验中所取得的临床效果研究

目的研究全自动血细胞分析仪、血液涂片细胞形态学联合应用在血常规检验中所取得的临床效果。方法选择我院2018年8月-2019年8月期间需要进行血常规检验的患者780例,按照随机数字表法分为两组均390例,其中对照组采取全自动血细胞分析仪,研究组在此基础上采取血液涂片细胞形态学,观察两组患者检测结果。结果研究组阴性率88.21%高于对照组75.13%,研究组阳性率11.79%低于对照组32.33%,究组在WBC(98.46%)、RBC(98.72%)、PLT(97.95%)上阳性率均高于对照组87.18%、85.90%、84.10%,差异有统计学意义,P<0.05。结论对于血常规检验期间,可采取全自动血细胞分析仪联合血液涂片细胞形态学,可有效提升诊断准确率,并确保患者后期治疗正常,值得应用。     

脐带间充质干细胞体外调节SLE患者淋巴细胞亚群功能的相关研究

为探讨体外脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cell,UCMSC)对SLE患者淋巴细胞亚群的调节,随机选取2017年8月至2019年2月于十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)住院诊治的SLE患者12例,该院同期门诊健康体检者10例则作为对照。从1例脐带供者中分离获得UCMSC,抽取两组受试者静脉血并分离淋巴细胞亚群后分组:A组为淋巴细胞,B组为淋巴细胞+UCMSC (UCMSC∶淋巴细胞数量为1∶20),C组为淋巴细胞+UCMSC(UCMSC∶淋巴细胞数量为1∶5)。MTT法检测淋巴细胞增殖抑制率,FACS检测细胞凋亡率与Treg百分比,ELISA检测淋巴细胞IL-6、TNF-α、M-CSF表达水平。结果显示,细胞共培养48 h后,B组与C组的T细胞增殖抑制率、IL-6、TNF-α、M-CSF表达水平显著高于A组(P0.05),B组也显著高于C组(P0.05);B组与C组的T细胞凋亡率低于A组(P0.05),C组显著高于B组(P0.05);B组与C组的Treg百分比降低(P0.05),B组显著低于C组(P0.05)。由此,UCMSC能在体外激活SLE患者T细胞亚群功能,具体表现为促进IL-6、TNF-α、M-CSF表达,抑制T细胞增殖和凋亡,抑制其向Treg分化。